HILIC-ZIL兩性離子柱-高效解決極性化合物分離產(chǎn)品
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如何高效分離極性化合物，是眾多化學(xué)分離領(lǐng)域從業(yè)者非常在意的問題。近年來，由于技術(shù)的更新，親水作用色譜（HILIC）在極性化合物分離使用場景越來越多，尤其在核苷類，糖類化合物，有機(jī)酸，氨基酸，多肽分析等應(yīng)用中，能看到各類HILIC柱品牌的使用。
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相對于傳統(tǒng)的反相色譜分離，HILIC具有強(qiáng)極性化合物的洗脫效果，最終分離效果會好很多，這也進(jìn)一步提高了企業(yè)的生產(chǎn)效率，節(jié)約生產(chǎn)成本。而在眾多的商業(yè)化HILIC柱中，兩性離子型HILIC柱是市場上使用比較多的一款。本文主要給大家介紹HILIC-ZIL兩性離子柱工作原理及分離效果。
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工作原理
從結(jié)構(gòu)上看，HILIC柱的固定相是極性官能團(tuán)，與正相色譜有點(diǎn)類似，但是HILIC條件流動相中有一定比例的水，而傳統(tǒng)正相色譜體系確實(shí)不存在水的。在分離過程中，正相體系下極性化合物容易被吸附在硅膠表面，這類化合物很難被洗脫干凈。而HILIC體系有一個親水層，因此不會出現(xiàn)強(qiáng)吸附問題。
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HILIC柱工作時，其固定相表面的親水作用會建立一個富集水的液體層，分析物就會在流動相和該親水層間進(jìn)行分配。主要表現(xiàn)為中性的極性化合物與固定相表面的極性基團(tuán)通過氫鍵作用；易帶電的極性化合物親水層進(jìn)行離子交換作用；弱極性或非極性化合物通過水與有機(jī)相的分配作用。
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固定相和水就形成一層“親水層”。而HILIC對極性化合物的分離機(jī)制就取決于固定相結(jié)構(gòu)以及“親水層”的厚度。
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分離效果
HILIC色譜柱的流動相使用的是高濃度極性有機(jī)溶劑和水的混合液。有機(jī)溶劑常可以選擇乙睛或醇類化合物，水的含量通常為5%以上。
一般來說，0.5-1%含量的水，，就可以形成很厚的“親水層”，從而多層吸附。分析物在“親水層”和流動相之間進(jìn)行分配。HILIC體系下水相是洗脫相，水相比例的提高有助于強(qiáng)極性化合物進(jìn)行洗脫，具體洗脫情況如下圖所示。
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規(guī)格參數(shù)
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命名 |
粒徑 |
比表面 |
碳載量 |
pH耐 |
特點(diǎn)及應(yīng)用 |
常用產(chǎn) |
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USHD |
5μm,100? |
400 |
6 |
2-9 |
> ??Hilic親水作用離子交換色譜柱，鍵合兩性離子官能團(tuán)，可分離包含酸性、堿性和/或兩性離子的溶質(zhì)。 |
4.6*250 |
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以恒譜生uHPLCs公司的HILIC-ZIL兩性離子柱為例，它是以磺酸烷基甜菜堿為功能基的兩性離子柱。
磺酸烷基甜菜堿具有離子對色譜中反離子的作用，磺酸根帶負(fù)電荷對帶正電的分析物有靜電作用，甜菜堿帶正電荷對帶負(fù)電的分析物有靜電作用，磺酸根在外側(cè)，因此對帶正電的化合物靜電作用更強(qiáng)。對于嘌呤和嘧啶等元素有著非常突出的分離效果（具體分離情況如下圖所示）。
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（1）胸腺嘧啶（2）尿嘧啶（3）腺嘌呤（4）鳥嘌呤（5）胞核嘧啶
在實(shí)際使用中，由于中溶質(zhì)、固定相和流動相相互作用及其復(fù)雜性，很多分離效果并沒有達(dá)到理想狀態(tài)，HILIC在極性化合物分離中的顯著效果，可彌補(bǔ)反相色譜的局限性。
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更多分離技術(shù)的提高，依賴于技術(shù)手段的提高和研發(fā)人員的辛勤投入。恒譜生作為專業(yè)的儀器耗材供應(yīng)商，致力于不斷提高色譜柱分離效果與產(chǎn)品質(zhì)量。
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發(fā)布于: 2024-06-27