C18 色譜柱是高效液相色譜(HPLC)中最常用的一種色譜柱,它的分離原理基于吸附色譜和分配色譜的原理。
在吸附色譜中,固定相是一種吸附劑,它能夠吸附樣品中的各個(gè)組分,使得各個(gè)組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。在 C18 色譜柱中,固定相是由硅膠或其他吸附劑表面鍵合了十八烷基(C18)官能團(tuán)的吸附劑組成的。C18 官能團(tuán)具有親水性,可以與流動(dòng)相中的水分子相互作用,從而在流動(dòng)相和固定相之間形成一層水膜。
當(dāng)樣品流經(jīng) C18 色譜柱時(shí),樣品中的各個(gè)組分會(huì)與固定相上的 C18 官能團(tuán)相互作用,使得各個(gè)組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)不同。分配系數(shù)越大的組分,在固定相上的保留時(shí)間越長(zhǎng),從而在色譜圖中出現(xiàn)的時(shí)間越晚。而分配系數(shù)小的組分則會(huì)在流動(dòng)相中更快地移動(dòng),在色譜圖中出現(xiàn)的時(shí)間越早。
此外,C18 色譜柱還可以通過(guò)改變流動(dòng)相的組成和 pH 值等參數(shù),調(diào)節(jié)樣品中各個(gè)組分與固定相之間的相互作用,從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。例如,在酸性流動(dòng)相中,弱堿性化合物的保留時(shí)間會(huì)延長(zhǎng),從而提高它們的分離效率。
總之,C18 色譜柱的分離原理是基于吸附色譜和分配色譜的原理,通過(guò)樣品中各個(gè)組分與固定相上的 C18 官能團(tuán)相互作用,實(shí)現(xiàn)不同組分的分離。通過(guò)改變流動(dòng)相的組成和 pH 值等參數(shù),可以調(diào)節(jié)樣品中各個(gè)組分的保留時(shí)間和分離效率,從而實(shí)現(xiàn)更好的分離效果。
發(fā)布于: 2023-08-28