C18 柱是高效液相色譜中常用的色譜柱之一,它的固定相是通過(guò)化學(xué)鍵合的十八烷基(C18)官能團(tuán)。隨著使用時(shí)間的增加,C18 柱的性能可能會(huì)下降,這時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行再生以恢復(fù)其性能。以下是一些常用的 C18 柱再生方法:
1. 反向沖洗:將 C18 柱反向連接到液相色譜系統(tǒng)中,用高比例的有機(jī)溶劑(如甲醇或乙腈)沖洗色譜柱,以去除殘留的樣品和雜質(zhì)。沖洗時(shí)間通常為 30-60 分鐘,流速為正常分析流速的 2-3 倍。
2. 正向沖洗:將 C18 柱正向連接到液相色譜系統(tǒng)中,用低比例的有機(jī)溶劑(如水或緩沖液)沖洗色譜柱,以平衡固定相和流動(dòng)相。沖洗時(shí)間通常為 30-60 分鐘,流速為正常分析流速的 2-3 倍。
3. 氫氧化鈉清洗:對(duì)于一些難以清洗的污染物,可以使用氫氧化鈉溶液進(jìn)行清洗。將 C18 柱反向連接到液相色譜系統(tǒng)中,用 0.1-0.5 M 的氫氧化鈉溶液沖洗色譜柱,流速為正常分析流速的 2-3 倍。沖洗時(shí)間通常為 30-60 分鐘,然后用高比例的有機(jī)溶劑沖洗色譜柱,以去除殘留的氫氧化鈉。
4. 高溫烘烤:將 C18 柱從液相色譜系統(tǒng)中取出,在 120-150℃下烘烤 2-4 小時(shí),以去除吸附在固定相上的有機(jī)物和水分。
需要注意的是,不同的 C18 柱可能需要不同的再生方法,因此在進(jìn)行再生之前,請(qǐng)務(wù)必查看色譜柱的說(shuō)明書或咨詢色譜柱生產(chǎn)商。同時(shí),再生過(guò)程可能會(huì)對(duì)色譜柱造成一定的損害,因此再生次數(shù)不宜過(guò)多,建議在必要時(shí)進(jìn)行再生。
發(fā)布于: 2023-08-28