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如何生成真實的液相色譜分析結果?

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???????? 作為一名液相色譜工作者,您最關心的還是生成真實實驗數據,這些數據可以在任何其他實驗室的相同條件下被普遍接受和重現。如果忽視全球公認的規(guī)范,即使使用最復雜的工具也無法達到目的。系統(tǒng)適用性是在化學分析中生成有效數據的關鍵。

??????? 液相色譜法,是從事制藥、食品、法醫(yī)學、聚合物、生命科學和環(huán)境研究的實驗室中應用廣泛的技術。數以千計的高效液相色譜儀在全球制藥行業(yè)的研發(fā)和質量控制實驗室工作,每天都會產生大量數據,這有助于開發(fā)安全有效的藥物。在根據此類數據做出決策之前,HPLC 系統(tǒng)應滿足系統(tǒng)適用性的要求至關重要。

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??????? 什么是系統(tǒng)適用性?系統(tǒng)適用性測試是色譜分析的重要組成部分。它們幫助我們確定檢測靈敏度、分辨率和重現性是否足以滿足所需的分析。美國藥典 (USP) 是原料藥色譜指南的權威來源。USP 第 621 節(jié)規(guī)定系統(tǒng)適用性測試是氣相和液相色譜分析的一個組成部分?;谶@樣的概念,設備、電子設備、分析操作和待分析的樣品構成一個可以進行評估的整體系統(tǒng)。這意味著除非滿足系統(tǒng)適用性的要求,否則不接受任何樣品分析。

??????? 導致 HPLC 分析中系統(tǒng)適用性失敗的因素有很多,恒譜生總結了以下幾點:

??????? 自動進樣器 – 由于無法準確提供設定體積的樣品和標準品,精度較差。

??????? 色譜柱——老化的色譜柱或堵塞的色譜柱會由于理論塔板數減少而導致性能下降。色譜柱老化的情況有很多,也有存在柱頭污染導致色譜柱使用壽命縮短報廢的問題。

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??????? 泵 – 由于操作部件的磨損而無法提供恒定流速的流動相。

??????? 流動相 – 制備規(guī)定混合物時的錯誤和脫氣不完全。

??????? 樣品和參考制備 – 制備不準確或注射前未使用溶劑進樣口過濾器過濾。樣品雜質和流動相雜質一定要去除,否則進入液相系統(tǒng)會造成很多問題。在色譜柱前添加保護柱能夠有效預防雜質污染柱頭,造成柱頭塌陷等問題。

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??????? 需要多久進行一次系統(tǒng)適用性測試?根據監(jiān)管機構的指導方針,系統(tǒng)適用性應符合整個色譜系統(tǒng)的要求,而不僅僅是單個模塊。每當設備或關鍵試劑系統(tǒng)發(fā)生重大變化時,應在樣品注入前進行適用性測試。系統(tǒng)失效時獲得的樣本分析結果對系統(tǒng)適用性的要求沒有意義。

??????? 系統(tǒng)適用性必須在所有受監(jiān)管的測定之前和整個過程中進行。在色譜運行開始時應用適用性測試并假設系統(tǒng)將在運行期間正常運行是不夠的。包含主要成分和預期雜質的測試混合物可以在開始時注入并在測試過程中散布。在面臨系統(tǒng)適用性失敗時,分析人員應立即停止分析。在診斷出問題并采取補救措施后,應重新進行適用性測試。只有在滿足所有系統(tǒng)適用性標準后才應恢復實際樣品的分析,而不僅僅是失敗的標準。

新聞底欄


發(fā)布于: 2022-01-14
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