制備型高效液相色譜柱的填料通常是粒徑較大的球形顆粒,如 5 μm、10 μm 等,這樣可以提高柱效和載樣量,但也會(huì)導(dǎo)致色譜柱的滲透性降低,因此需要使用高壓泵和高流量的溶劑來(lái)保證流動(dòng)相的充分滲透和樣品的充分洗脫。
對(duì)于 C18 色譜柱,制備型的填料通常是鍵合了十八烷基的硅膠,這種填料具有良好的疏水性和親脂性,可以用于分離和純化親脂性化合物,如藥物、生物大分子等。
在制備型高效液相色譜柱的制備過(guò)程中,需要注意以下幾點(diǎn):
1. 填料的選擇:需要根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和色譜柱的使用目的來(lái)選擇合適的填料,如粒徑、孔徑、碳鏈長(zhǎng)度等。
2. 色譜柱的裝填:需要使用高精度的裝柱設(shè)備和技術(shù),保證填料的均勻分布和緊密堆積,以提高柱效和載樣量。
3. 色譜柱的測(cè)試:需要對(duì)制備好的色譜柱進(jìn)行測(cè)試,包括柱效、分離度、保留時(shí)間等,以確保其符合使用要求。
4. 流動(dòng)相的選擇:需要根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和色譜柱的使用目的來(lái)選擇合適的流動(dòng)相,如溶劑種類、比例、pH 值等。
總之,制備型高效液相色譜柱的制備需要一定的專業(yè)知識(shí)和技能,如果沒(méi)有經(jīng)驗(yàn),建議購(gòu)買商業(yè)化的制備型高效液相色譜柱,或者尋求專業(yè)人士的幫助。
發(fā)布于: 2023-08-28